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更新時間：2017-03-03   點擊次數：3986次

1.氨基柱既可以正相使用，也可以反相使用，但是要注意到的是：正相溶劑和反相溶劑往往是不互溶的，正常情況新氨基柱保存在正相環境中，例如LUNA 氨基柱保存在正己烷-乙腈（99：1）中。
   2. 正相使用
   2.1 新柱子可直接用流動相。推薦先用正己烷-乙腈（99：1）以0.5ml/min的流速沖10倍柱體積，再根據流動相選用極性相近的二氯甲烷以相同的流速沖10倍柱體積，zui后換成流動相。
   2.2 正相使用時，不宜分析含醛基、羰基的化合物，不可用于還原糖的分析；流動相要*脫氣，并不得含有羰基化合物和過氧化物（質量不好的*含有少量）。
   2.3 任何時候更換流動相時都要確保新流動相與柱子原保存液可互溶。
   3 反相使用
   3.1 先用正己烷-乙腈（99：1）以0.5ml/min的流速沖10倍柱體積，再依次以相同的流速相同的用量用異丙醇、甲醇、甲醇-水（50：50）沖柱子。
   3.2 以0.5ml/min的流速用30倍柱體積的pH11.0的（LUNA）水溶液沖柱子（注意pH值切不可超過11.0），立即用水（0.5ml/min的流速，30倍柱體積）沖洗，再換成流動相。
   3.3 配制流動相時，應各組分分別量取，比例較小的組分要精密量取，需調pH值時要精密到0.1。
   3.4 反相條件下使用時，要特別注意控制pH值范圍，pH值越低越有發生水解的危險，流動相中水的比例越高當然也越有發生水解的危險。的pH范圍在pH 3.0-7.0
   3.5 如果要使用的流動相中還含有緩沖鹽類，建議在用分析流動相之前，先用不含緩沖鹽的同比例流動相過渡，這樣可避免緩沖鹽在分析柱內的析出。
   3.6 有一種情況是，當使用氨基柱進行酸性物質的分析時，酸性物質的存在意味著質子的存在，可能會使略帶負電荷的氨基官能團質子化，導致使用一段時間后對于某些類的分析物保留性質有所改變或表現在柱效下降。建議：用5-10倍的柱體積的含0.5-1.0％NH3的乙腈-水(50:50)溶液沖洗該柱（沖洗后當然要再用不含堿的流動相洗去多余氨），之后再進行分析這類酸性分析物時建議在流動相中略微添加少許氨如0.1％。
4 色譜柱的沖洗：簡單說起來，正相條件下使用的氨基柱就參照硅膠柱的清洗方法；反相條件下使用的氨基柱就參照C18的清洗方法。
  5 色譜柱的保存
  5.1 正相使用時，將柱子沖洗干凈后，用正己烷-乙腈（99：1）保存。
  5.2 反相使用時，如短期不用，可用甲醇或乙腈保存；長期不用時需將甲醇依次用異丙醇置換，zui后用正己烷保存。
6 色譜柱的再生
6.1 方案1：依次用甲醇、異丙醇、正己烷、異丙醇、甲醇沖柱子（各以0.5ml/min的流速，20倍柱體積），再換流動相。這些清洗方法，主要是針對當樣品中有雜質逐步吸附累積到填料上時的處理方法，色譜柱表現行為為諸如柱壓增高柱效降低等。
6.2 方案2：NH2柱用于反相條件時，NH2鍵會水解，尤其是在該柱子pH范圍以外，在酸性和堿性條件下柱壽命會下降很快，如果在這個條件下使用需要清洗一下，需要用10倍柱體積溶液沖洗，如下：
      95％水/5％乙腈
      THF*
      95％乙腈/5％水
      并保持95％乙腈/5％水繼續沖洗，以低流速0.2-0.5mL/min沖洗。
6.3 方案3：柱子使用一定時間后，柱效下降，老化，也可清洗一下柱子恢復柱性能,清洗時依次用10倍柱體積的下列溶液沖洗：
      95％水/5％乙腈
      THF*
      95％乙腈/5％水
再走流動相即可

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